浅谈爱车速腾小改装，改装后就是不一样 ♂
浅谈爱车速腾小改装，改装后就是不一样
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我的速腾1.4T已经开了6年多了，一直想换辆SUV开开，由于家中小宝宝刚出生，媳妇在家全职照看，凭我自己挣钱养家，实在是实力不允许啊
闲鱼上300元淘来的，支持手机映射、蓝牙等功能，很实用
刷的隐藏功能：运动仪表，是不是很酷
车载加热水杯，冬天车上必备神器
保养送我的手机吸盘，挺美观，也很实用
车载负离子空气净化器，老车必备
淘宝买的自动大灯开关，秒变自动大灯
GTI格子布风格坐垫
这个二哈颈枕的眼神是不是很犀利
有了腰靠，长途开车也不累
豪华型原厂氙气大灯
大灯喷水是不是很唬人
刀锋状雾灯隔栅
蜂窝状上下前中网
GLI标识很酷
鲨鱼鳍天线，一看就是顶配
樱桃红熏黑尾灯
小押尾也很犀利
假装参加过漂移锦标赛
排气管加粗镀铬
总揽一下
左45度
右45度
我也觉得白色比较好看，冰蓝色比较土一点，其实不如直接改GLI大灯总成，一步到位。
6000K正白色。不换也很好！
没有必要换了吧，换大灯总成费用不少，至少不划算。
宝马的日行灯有些型号也是黄色的~不奇怪，不过速腾的日行灯材料有些差，是卤素灯，不是LED灯~ 日间行车灯越来越多的普及在各个级别车中。欧盟在几年前已推广。有的国家法规更是要求开日行灯（没有的话，要开试宽灯就是常说的小灯，一个作用） 人...
应该可以改的，现在坊间有大灯总成可以直接整个换掉，原则上，只要是现有的灯都能改成led，唯方向灯部份，若要更换成led需再换方向灯闪烁器
概述： 说实话，速腾车这几种颜色都不难看，颜色并不重要，关键是看你对车怎么打理和爱惜自己爱车的程度而定，再好看的车，不勤打理，脏兮兮的也不好看。 不用纠结颜色，因每人性格不同，审美观点不同，视角不同，各种颜色各有利弊，就看你站在...
在这个车企越来越注重家用车市场的年头，热血少年想要一部有个性的性能车是多么难的一件事。而类似速腾这种级别的“家庭第一辆车”的车型来说本来应该好好地墨守成规，但想不到的是大众却给这种买车车引入了高性能版本，他就是今天的主角速腾GLI。
大众在速腾（国外就叫捷达）上出高性能版本的套路已经不是一天两天了，从第二代方头捷达的GTX、MK2到第三代MK3配备VR6，从宝来（第四代）应用当时大众最新技术的24气门?2.8L?V6引擎到宝来R，从采用多连杆后悬挂提高操控性的速腾GLI（第五代）到如今第六代速腾GLI······
最初只是对它改了避震和轮毂，虽然一开始只有小小的改变，但这点小变化已经给车主带来了不一样的感觉，也许这就是改装的乐趣。
在尝试了改装带来的满足后，车主便一发不可收拾了，越改越深入，越来越停不下脚步，于是有了我们现在见到的这个模样。眼前这台速腾，车主主要还是从外观入手，所谓“一低遮百丑”，车主为这台速腾改了Air?Lift?Performance?Slam气动，配合Air?Lift?Performance控制系统，可以让车子降到相当低矮的境地，正如我们所见，低矮的车身高度让车子看起来更富张力。
车尾部分，则同样以GLI样式为主，尾灯、行李箱盖上的扰流板、后保险杠等等都是来自GLI。
这，也正是改装的魅力！当然只要你想改，你的速腾也能这么帅！
如今已是2020年，95后再也不是当年大家眼里的孩子们，他们已经逐渐走向社会，成为社会的中流砥柱。今天这辆非常帅气的速腾车主萧萧就是一个95后，在他手里，这辆速腾逐渐从寻常可见的家用车变成独一无二的绞牙战士。接下来就跟随萧萧的描述，了解他和他这辆速腾美好的故事吧。我是95后，在我这个年龄段身边的朋友们都有了人生的第一辆车，一人在外工作的我其实用车的时间并不多，但是这个东西需要的时候如果没有就很尴尬。2019年的12月底我和妈妈视频，我说：“妈，马上回家过年了我想买辆车。”妈妈一开始也反对因为她知道我平时用车并不多，后来也是顾及到我的想法，毕竟我也不是小孩了也有自己的工作，买车也不用家里经济上的支援所以就同意了。休假回家下了火车直奔一汽大众4S店去买高尔夫，高尔夫不仅是家用车首选，而且改装配件也是比较全的，结果一进大厅就看到了这辆速腾，自己一直只关注了高尔夫对速腾这个车一直也没有关注过，经过销售的一番介绍后感觉价格可以优惠挺高的，动力买菜够用，配置也能满足日常需求所以决定就买它了。销售说目前就有一辆金色和一辆银色，黑色白色要等10天左右的时间，我当时一想假期就10天哪来得及，直接交钱让销售把这台车给我开出展厅提走，当我交完钱的那一刻我才想起来我是来买高尔夫的。把车提回家之后自己就在网上找速腾的改装件，因为新车上市不久，市面上开发配件就那一两款，而且都不是很合自己的胃口，到后来经过朋友的推荐可以使用一些车型通用的配件。刚提车自己手头也不是很宽裕，然后就定了一套国产的18寸旋压轮毂，一套轮胎，运动方向盘，前铲，小鸭尾，运动熏黑中网，然后就激动的把这些配件拿到朋友店里装，第一次还是蛮激动的后来和朋友在一起聚会他们说我是金甲战士，说我这个颜色像是40岁人开的，我当时真的很尬，因为选这个颜色也不是我想的，然后经过朋友的介绍决定改个颜色，当时就定了个特别火的电光金属黑，因为当时在一起玩的也都是贴的这种，看起来还是蛮战斗蛮有质感的。经过了漫长的三天，朋友把车交到了我的手上，当时真的是特别的激动，当时没有买到自己喜欢的颜色，现在终于满意了。当时在老家休假，经历了一场小的事故，整个保险杠和大灯还有我买的一些零件全给撞碎了，当时心里还是非常的难受的。然后又买了一套中网和前铲，改色膜也要重新补，问几个贴膜店不愿意接这个活，没有我这个品牌的膜怕给我贴了有色差，然后我又联系我朋友从上海发了四米的膜。经过了一周漫长的等待车终于修好了，然后带着朋友寄过来的膜去找人去贴，贴完了还是还是当初样。回了上海以后身边朋友总说百改降为先，说我车太高了像是SUV，我也是控制不住自己的爱美之心，根据自己的经济能力在朋友店里定了一套国产4活塞国产刹车和国产的街道版绞牙避震。避震和刹车装好以后来来一个全车精洗美美的拍个照。9月底在大众车友群里接到了通知，国庆在常州组织太湖湾汽车文化生活节，我怀着激动而又忐忑的心情去找领导请了假没想到领导批了，为了庆祝能出去参加聚会，高兴的定了一套国产中尾段阀门排气。终于等到了10月1日，本来约好了几个朋友从上海一起出发，结果“十一”高速路严重堵车大家决定各自出发，然后我独自一人驾车从上海开车到常州用了7个小时，当时在高速路又饿又困又想上厕所特别的崩溃，直到我把车开到了露营谷门口，瞬间感觉这段时间付出的一切都是值得的。常州之行也给2020年画上了一个完美的句号。从买车到现在也有10个月的时间了，从刚开始的不懂到现在的略懂，在这个过程中也体会到了玩车的乐趣，也体会到自己专心的去做一件事获得的那种满足感。在接下来的日子里我会继续坚持我的爱好，把新的想法融入到的车上，把好的一面展现给广大的速腾车友，我是速腾车主，我为速腾call！改装清单全车艾利丹尼森电光金属黑改色膜（包含全车镀铬黑化）XPEL黑武士隔热膜18寸迈斯盾旋压轮毂tei4活塞卡钳配355刹车盘DWD街道版绞牙避震SRT中尾段直通排气R版运动方向盘碳纤维三段式前铲R版运动后扰流板碳纤维鸭尾美版GLI蜂窝中网碳纤维后视镜壳车友：聚变-萧萧
我以前卖一汽大众的，你的改装预算比较少，难以抉择。看你是要动力提升还是外观了，1.6L速腾的发动机是小马拉大车，确实很吃力，推荐你改动力吧，外观就换个GLi（高尔夫叫GTi，JETTA叫GLi）的中网。灯光都别动，先省着。
改进气，换个好点的进气风箱，铝合金进气歧管
改点火，换个高压火花塞，加一个点火增强器，改装地线，高压点火线圈等等。
改排气，1.6的车必须注意排气的回压，如果排气管过大会造成损失低扭。所以推荐改个铝合金回压中段和铝合金的大回压尾鼓就可以了。轮胎这些不用动，越改大，起步就越吃力，16正好。
操控的话以目前状况没必要进行改动。
黑色车漆改色成白色有两种方法：一个是喷漆，另一个是贴纸，只要涉及漆面改色都要到车管所备案，手续不发杂，但施工有一定的难度，如果选择贴纸需要两天的时间，费用大概2500元—4000元，如果是喷漆需要一周的时间，费用大概是3000元—5000元。
测定vc有哪几种方法,每种方法的使用范围 ♂
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维生素C不同的测定方法
目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.
为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以“维生素C或抗坏血酸和测定“为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％,其中光度法占65.69％,电化法占18.63％,色谱法占12.75％;复杂被测样品文献占文献总量的45.06％,其中光度法占60.92％,色谱法占19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显.
一．荧光法
1．原理
样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2．适用范围
本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定
3. 注意事项
3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。
3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。
3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。
二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）
1、原理：
还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。
2、注意事项
⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水；
⑵ 滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；
⑶ 样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C；
⑷ 贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生；
⑸ 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；
⑹ 在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；
⑺ 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。
3优点：它具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。在酸性环境中，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP还原成无色的还原型2,6—DCIP，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色，但在酸性溶液中则呈粉红色。因此，当用2,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被还原成无色，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下微量过剩的2,6—DCIP 便立即使溶液显示淡粉红色或微红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化。依据滴定时2,6—DCIP 标准溶液的消耗量 (ml)，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量。氧化型2,6—DCIP与还原型抗坏血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后，再用2,6—DCIP标准溶液滴定至终点。
食物和生物材料中常含有其他还原物质，其中有些还原物质可使2,6—DCIP还原脱色。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰，可用抗坏血酸氧化酶处理，破坏样品中还原型抗坏血酸后，再用2,6—DCIP 滴定样品中其他还原物质。然后从滴定未经酶处理样品时2,6—DCIP标准溶液的总消耗量中，减去滴定非抗坏血酸还原物质2,6—DCIP 标准溶液的消耗量，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2,6—DCIP标准溶液的体积，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量。另外，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2,6—DCIP反应速度的差别，并通过控制样品溶液在pH1 — 3 范围内，进行快速滴定，可以消除或减少其他还原物质的作用，一般在这样的条件下，干扰物质与2,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制。生物体液（如血液、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低，并且存在许多还原物质的干扰，同时还必须预先进行脱蛋白处理。在生物体液中含有巯其、亚硫酸盐及硫代硫酸盐等物质，它们都能与DCIP反应，但反应速度比抗坏血酸慢得多。样品中巯基物质对定量测定的干扰，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除。
三、2，4-二硝基苯肼法
1．原理
总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。
2．适用范围
本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。
这是脎比色法，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一，是一种全量测定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V，然后与2，4—二硝基苯肼作用，生成红色的脎，将脎溶于硫酸后进行比色。最近国标中该法强调空白，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽、背景不一的误差。在实际杨梅汁Vc测定中，操作时间长，操作要求较严格，试剂较多，就一般实验室而言是目前可以采用的方法。
四 碘量法
1、维生素C的原理
维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。
2、注意事项
（1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度。
（2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点。
五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学方法）
1.应用于食品，饮料及生物制品检测
2.比色方法
此方法用于检测水果和蔬菜（如马铃薯），水果和蔬菜产品（如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁），婴儿食品，啤酒，饮料，流食，粉状和烘烤剂，肉产品，奶制品，葡萄酒，还有动物饲料，医药品（如维生素配制、阵痛药、退烧药）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)，
3.分析物
L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitamin C)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原因，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。它是一种相对敏感的物质，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。
L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分，如维生素产品和阵痛药，另外，它还用于动物饲料添加剂中。
4.原理
L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—》 dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X
L-抗坏血酸 + ? O2 AAO——》 dehydroascorbate + H2OX
5.特异性
在给定的条件下，此方法特别针对于L-抗坏血酸。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。
6.灵敏度
测定灵敏度为0.005个吸光度单位，样品体积为1.600ml，此相当于0.1mg/l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。0.015个吸光度单位的差异能造成0.3 mg/l检测限，样品最大体积为1.600 ml.。
7.线性
测定的线性范围为0.5 ugL-抗坏血酸（0.3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1.600ml）到20 ugL-抗坏血酸（0.2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0.100ml）
8.精密度
在用一个样品做重复实验时，可能会产生0.005-0.010个吸光度单位的差异。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%。当分析检测数据时，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。
9.干扰及错误来源
粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和 亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。
10.试剂盒包括内容
1.磷酸盐/柠檬酸缓冲液 ———— pH值大约3.5；MTT
2.AAO（坑坏血酸-氧化酶）—— 每板约17 U AAO
3. PMS 溶液
六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C
基于在一定的反应条件下，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。该方法很方便、快速地测定生物、药物等试样中的维生素C，准确度和重复性均达到令人满意的程度。
1 适用范围
本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。
2 测定原理
染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。
用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。
七.二甲苯－二氯靛酚比色法
1 适用范围
测定深色样品中还原型抗坏血酸。
2 测定原理
用定量的 2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。
八.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)
自1965年首次应用于复杂农业样品分析后，因其具 有样品处理简单、分析速度快等优点，逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺 织、农业、食品、药物分析等领域。在药物分析中，NIRDRSA可以进行定性 鉴别、定量分析等工作。
维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其药典含量测定方法为碘量法。我 们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理，方法简便，结果可 靠。
这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的 频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息 。由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计 算机技术与化学计量学方法。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)，首先利用 定标集建立预测模型，然后将预测集作为未知样本，根据预测模型进行预测。
对所选择的谱区范围，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理，对25个样品进行交叉 验证，即选择一个样品，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据，并设光谱主成分数 为1，循环迭代样品数和主成分数，计算预测残差平方和,确定所需主成分数。若主成分选择 过小，会丢失样品信息，过大会造成过度拟合。当主因子为2时，预测残差平方和值最小， 为2.029，故选择主因子数为2，建立最佳PLS校正数学模型。
九 电位滴定法
1.原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.
Pt为指示电极，甘汞作参比电极
E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)
2.原理(具体来说:)
随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。
3.计算式：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%
4.优点：
解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题
用线性电位滴定法分析抗坏血酸,抗坏血酸回收率为99.80％～101.5％,相对标准偏差为0.61％;分析维生素C片中的抗坏血酸,相当标示量为98.90％～100.5％,相对标准偏差不大于0.48％,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的.
十 .分光光度法
1. 原理：
维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH》5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎
脎在500nm波长有最大吸收
根据样品溶液吸光度，由工作曲线查出VC的浓度，即可求出VC的含量
十一 库仑滴定法
1.原理：库仑滴定法属于恒电流库仑分析。
是在特定的电解液中，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。
2.基本依据－－法拉第电解定律：电解时，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比
即： m=MQ/zF = MI t /zF
3..化学反应：阴极反应： 2H+2e-=H2 阳极反应： 2I-=I2+2e-
4.终点指示：多种方法
(1)化学指示剂－－I2
(2)电位法
(3)双铂极电流指示法
5.计算式：Wvc=MvcQ/zFm样式中： F--- 法拉第常数（96487C）
Z---电极反应中转移的电子数注意：使电解效率100％
6.优点：
1）无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，标定）
2）只需要一个高质量的供电器，计时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制
3）若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间
4）电量容易控制及准确测量；方法灵敏度，准确度较高
5）滴定剂来自电解时的电极产物，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，如Cu＋,Br2,Cl2产生后立即与待测物反应。
7.缺点(难点)：
要求电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100％
8.注：电流效率＝i样÷i总＝ i样÷（ i样＋ i容＋i杂）
因为：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等
十二 紫外快速测定法
原理
维生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。
十三 光电比浊法的原理
原理
在酸性介质中,抗坏铁酸与亚硒酸(H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应.1mol的抗铁酸能将2mol的亚硒酸还原成硒.在一定条件下,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液.当抗铁酸的浓度在0-4mg/25-50ml的范围内,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸.
十四荧光分析法的原理
原理
用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸,使脱氢抗坏铁酸形成 硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物,它不与邻二苯胺生成荧光化合物.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正
十五 原子吸收间接测定法
原理
这是最近报导的一种Vc测定法，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀，在高速离心机下有效地分离出沉淀，小心洗涤后再经浓硝酸溶解，用原子吸收法测定铜含量，即可推知样品中维生素C的含量。该法实验仪器较昂贵，主要问题是操作过程中反应完全与否，沉淀物洗涤、离心反复多次，极容易带来误差。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，有一定的发展前景。根据试验，发现此法结果偏低，还有待于进一步优化改善。
十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法
本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法。于5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液，混匀，加二次蒸馏水定容至刻度，再充分混匀，在分光光度计上，于520nm处测定吸收值，同时作空白试验。本发明测定方法简单、快捷，所用仪器价廉，试剂易得
十七 L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的方法
研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备方法和其电化学行为，并用于维生素C的测定，发现该电极对VC有明显的电催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰，峰电流与VC的浓度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范围内呈良好的线形关系，相关系数为0.9962，其最低检测限可达1.0×10-6mol/L，与紫外光谱法测定的结果一致。
测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧化剂。
十八 梅特勒-托利多仪器法
传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定的实验方法。
除此之外，还有双光束剩余染料差减比色法，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法、聚中性红修饰电极方法、示波溴量法、流动注射化学发光抑制法、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测方法、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的方法等。在此不做介绍。
如图所示，那个比较复杂的体是UG本身自己完成建模的，所以基本上没有什么错误。另外一个是从其他设计软件导入进来的模型，由于设计软件不同，公差不一致，算法也有区别，所以导入时候会出现模型的BUG，检查器可以显示出这些错误，并且分类显示出来，从而判断这些错误是否需要修改或者忽略。
检查边界：就是限制刀路不走到你首选择的边界区域内。
修剪边界：就是把你不要的刀路修剪掉（修剪刀路时要注意内部和外部）
指定修建边界并不是每次设置都必须的，它是指当你产生的刀路超出原本需要的范围时，就可以指定修剪边界来去除掉不需要的刀路。
1、操作方法：选择——分析——模具部件验证——壁厚检查
结果显示：
通过分析我们可以知道产品那些地方料厚是不均匀的
是因为你没有选中所有的特征，要包括体、面、边。例如，如果只检查了一个体，那么面和边的结果就是无结果。
原发性膀胱输尿管反流症状主要从两方面表现肾积水和尿路感染反流导致上尿路内尿液无法排空定程度即会产生肾盂和输尿管扩张超声上反映出来因此凡超声发现肾积水都应行VCUG排除反流由于相当部分患儿无症状反流高危人群用超声进行反流筛查有实际意义尿路感染儿童更多表现非特异性包括发热、嗜睡、无力、厌食、恶心、呕吐和生长障碍等婴幼儿无菌反流表现肾绞痛表现典型大儿童指出膀胱充盈或排尿时肋部疼痛年长儿并发急性肾盂肾炎时,也有腰、腹部疼痛和触痛 实时B超检查作诊断反流过筛检查排尿性膀胱尿道造影(VCUG)确定膀胱输尿管反流诊断和分级金标准凡超声检查发现肾积水和有泌尿系感染发作均应进行VCUG由于小儿对检查恐惧和合作防止产生假阴性结造影时予镇静剂适当时要重复进行般根据排尿性膀胱尿道造影(VCUG)结原发性膀胱输尿管反流分5级(图2): Ⅰ级:反流仅达输尿管 Ⅱ级:反流至肾盂肾盏输尿管无扩张 Ⅲ级:输尿管轻度扩张或(和)弯曲肾盂轻度扩张和穹隆轻度变钝 Ⅳ级:输尿管度扩张和弯曲肾盂肾盏度扩张多数肾盏仍维持乳头形态 Ⅴ级:输尿管严重扩张和迂曲肾盂肾盏严重扩张多数肾盏乳头形态消失
小儿原发性膀胱输尿管反流的治疗方法？小儿原发性膀胱输尿管反流的治疗方法有几种？回答者：qiyuk收集到一些治疗小儿原发性膀胱输尿管反流的资料，希望对你有帮助 本病的防治主要是防止肾损害的发生和进展，最重要的是制止尿液逆流和控制感染。抗逆流手术应用于临床已有30多年，由于PVUR可因年龄增长而逐渐消失或减轻，故手术适应证应严加限制。 Willscher等认为仅适用于： ② VUR持续存在，应用抗菌药物治疗仍反复感染者; ②重度VUR伴有感染者。近年使用内镜下注射teflon治疗，取得较好效果。 Normand及Smellie认为输尿管植入术并不能改善其预后。Torres等观察手术组与非手术组病人的结果，认为从确诊到发生肾功能衰竭的时间并无差别。 多数学者主张严格控制感染，等待VUR自行消失或减轻。对儿童VUR严格控制感染，经10年观察很少发现肾内瘢痕形成及进行性肾功能损害。小儿原发性膀胱输尿管反流药品治疗回答者：qiyuk治疗小儿原发性膀胱输尿管反流会比较常用到以下几种药品，建议您到正规医院就诊，在医生指导下用药: 肚痛丸,苏南山肚痛丸,香砂养胃软胶囊,绿梅止泻颗粒,仲景胃灵片,保和口服液,烂积丸,香砂养胃颗粒,解毒止泻胶囊,良附丸,舒肝止痛丸,左金丸膀胱输尿管反流可以治好吗？回答者：whxdnk120您好，尿路感染,如果是逆行性感染，主要是免疫力下降的情况下或正常，外阴不洁，通过尿道、膀胱、再到输尿管、肾的途径。也有病菌来自血液的情况，少见。你有先天性输尿管狭窄，说明在胚胎发育时不太正常。如果累及输尿管与膀胱的交界处，尿液反流，致病菌易上行的话，可能感染机会会增加。不过，正常人也是可以逆行感染的。再手术无必要，可能会加重病情！仅小量反流不会有多大问题，你主要是：加强锻炼，提高免疫力，控制塑逆行感染，这是关键！勤排尿，降低反流程度。祝早日康复！小儿原发性膀胱输尿管反流有什么症状？回答者：hugangk小儿原发性膀胱输尿管反流有以下症状表现和体征： 原发性膀胱输尿管反流的症状主要从两方面表现，肾积水和尿路感染。反流导致上尿路内的尿液无法排空，到一定程度即会产生肾盂和输尿管的扩张，在超声上反映出来。因此凡超声发现的肾积水都应行VCUG，以排除反流。由于相当一部分患儿是无症状反流，在高危人群中，用超声进行反流筛查有实际意义。尿路感染在儿童中更多的表现是非特异性的，包括发热、嗜睡、无力、厌食、恶心、呕吐和生长障碍等。在婴幼儿无菌反流可表现为肾绞痛，但表现不典型。大儿童可指出在膀胱充盈或排尿时，肋部疼痛，年长儿在并发急性肾盂肾炎时,也有腰、腹部疼痛和触痛。 实时B超检查可作为诊断反流的过筛检查，排尿性膀胱尿道造影(VCUG)是确定膀胱输尿管反流诊断和分级的金标准。凡超声检查发现的肾积水和有泌尿系感染发作的均应进行VCUG。由于小儿对检查的恐惧和不合作，为防止产生假阴性结果，造影时可予镇静剂，适当时要重复进行。一般根据排尿性膀胱尿道造影(VCUG)的结果，将原发性膀胱输尿管反流分为5级(图2)： Ⅰ级：反流仅达输尿管。 Ⅱ级：反流至肾盂肾盏，但输尿管无扩张。 Ⅲ级：输尿管轻度扩张或(和)弯曲，肾盂轻度扩张和穹隆轻度变钝。 Ⅳ级：输尿管中度扩张和弯曲，肾盂肾盏中度扩张，但多数肾盏仍维持乳头形态。 Ⅴ级：输尿管严重扩张和迂曲，肾盂肾盏严重扩张，多数肾盏中乳头形态消失。 膀胱输尿管反流缺乏特异性的临床表现，因此必须重视早期筛查。由于膀胱输尿管反流与泌尿系感染密切相关，故应加强对泌尿系感染患儿反流的筛查。一旦尿常规及清洁尿培养明确泌尿系感染，建议进行VCUG检查确定有无反流，但也有文献认为对5岁以下的女孩首次无热性泌尿系感染可不进行VCUG。VUR是导致胎儿及新生儿肾积水常见的病因之一，有人主张即使生后超声检查正常的胎儿肾积水，也应行VCUG检查，这是因为有25%的Ⅲ-Ⅴ反流生后超声正常。膀胱输尿管反流具有家族性及遗传倾向，因此对膀胱输尿管反流患儿的无症状同胞及其一级家族成员应进行VCUG检查明确有无反流。另外近年来认为许多学者提出不稳定性膀胱和非神经源性神经原膀胱是小儿膀胱输尿管反流的重要原因，此类患儿尿常规筛查如发现泌尿系感染则进行VCUG检查。小儿原发性膀胱输尿管反流需要做什么检查？回答者：whaik小儿原发性膀胱输尿管反流检查方法一般有以下这些内容，希望能给你带来帮助： 小便常规光镜或电镜扫描检查若见小管上皮细胞及异形红细胞增多，应考虑反流性肾病存在。蛋白尿可作为反流性肾病患者首发症状。尿微量蛋白测定(包括尿β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、视黄醇结合蛋白，尿白蛋白)及尿N-乙酰-β氨基葡萄糖苷酶(NAG)定量排出增多，对早期反流性肾病，肾瘢痕形成诊断有很大帮助，严重肾损害见肾小球滤过率下降。尿Tamm-Horsfall蛋白量减少，反映肾小管功能损害，慢性肾盂肾炎，慢性肾实质病变均见明显减少。 1.超声波检查 实时B超检查适用于诊断反流的过筛检查，若见输尿管、肾盂扩张应考虑有反流的存在，现在有采用彩流多普勒超声波检查，待膀胱充盈后排尿期观察反流情况，并可观察输尿管开口位置，有利于早期诊断，方法安全，无损伤痛苦。 2.放射性核素膀胱造影 能准确确定有无反流，但对确定反流分级不够精确，只可作为随访研究。静脉尿路造影可很好地显示肾脏形态，通过所显示的肾轮廓，可计算肾实质的厚度和肾的生长情况，但一方面，超声更加简单易行。 3.肾核素(DMSA)扫描 可清晰显示肾瘢痕情况，用于随访病儿有无新瘢痕形成，并可评价肾小球和肾小管的功能，确定分肾功能，比较手术前后的肾功能等。 4.尿培养：为了了解有无尿路感染，在无症状的病人，尿培养每三月一次，而在出现尿路症状或不明原因发热时必须立即进行尿培养。 5.排尿性膀胱造影检查：传统上，VUR的应每年一次排尿性膀胱造影检查，以监测反流是否自发缓解或升级，然而最近一项分析推荐在Ⅰ、Ⅱ级反流的儿童和单侧Ⅲ级反流的2岁以下儿童每两年进行一次，年长儿的Ⅲ级反流和任何年龄的Ⅳ级反流每三年检查一次。 6.DMSA检查和肾脏超声检查：建议1年1次，以监测有无肾瘢痕及瘢痕进展和肾脏的发育情况。 7.其它：每年测定血压、体重身高和血肌酐一次。小儿原发性膀胱输尿管反流有什么症状？回答者：ruanyingk小儿原发性膀胱输尿管反流有以下症状表现和体征： 原发性膀胱输尿管反流的症状主要从两方面表现，肾积水和尿路感染。反流导致上尿路内的尿液无法排空，到一定程度即会产生肾盂和输尿管的扩张，在超声上反映出来。因此凡超声发现的肾积水都应行VCUG，以排除反流。由于相当一部分患儿是无症状反流，在高危人群中，用超声进行反流筛查有实际意义。尿路感染在儿童中更多的表现是非特异性的，包括发热、嗜睡、无力、厌食、恶心、呕吐和生长障碍等。在婴幼儿无菌反流可表现为肾绞痛，但表现不典型。大儿童可指出在膀胱充盈或排尿时，肋部疼痛，年长儿在并发急性肾盂肾炎时,也有腰、腹部疼痛和触痛。 实时B超检查可作为诊断反流的过筛检查，排尿性膀胱尿道造影(VCUG)是确定膀胱输尿管反流诊断和分级的金标准。凡超声检查发现的肾积水和有泌尿系感染发作的均应进行VCUG。由于小儿对检查的恐惧和不合作，为防止产生假阴性结果，造影时可予镇静剂，适当时要重复进行。一般根据排尿性膀胱尿道造影(VCUG)的结果，将原发性膀胱输尿管反流分为5级(图2)： Ⅰ级：反流仅达输尿管。 Ⅱ级：反流至肾盂肾盏，但输尿管无扩张。 Ⅲ级：输尿管轻度扩张或(和)弯曲，肾盂轻度扩张和穹隆轻度变钝。 Ⅳ级：输尿管中度扩张和弯曲，肾盂肾盏中度扩张，但多数肾盏仍维持乳头形态。 Ⅴ级：输尿管严重扩张和迂曲，肾盂肾盏严重扩张，多数肾盏中乳头形态消失。 膀胱输尿管反流缺乏特异性的临床表现，因此必须重视早期筛查。由于膀胱输尿管反流与泌尿系感染密切相关，故应加强对泌尿系感染患儿反流的筛查。一旦尿常规及清洁尿培养明确泌尿系感染，建议进行VCUG检查确定有无反流，但也有文献认为对5岁以下的女孩首次无热性泌尿系感染可不进行VCUG。VUR是导致胎儿及新生儿肾积水常见的病因之一，有人主张即使生后超声检查正常的胎儿肾积水，也应行VCUG检查，这是因为有25%的Ⅲ-Ⅴ反流生后超声正常。膀胱输尿管反流具有家族性及遗传倾向，因此对膀胱输尿管反流患儿的无症状同胞及其一级家族成员应进行VCUG检查明确有无反流。
ug里检查破面的方法很多，比较简易和全面的有“检查几何体”命令，其步骤如下：
1.点击菜单栏中的“分析”命令---点击“检查几何体“
2.出现“检查几何体”对话框后，现选择要分析的面或体，然后勾选要分析的项目，例如要检查面有没有微小破损，就在“微小的”前面打钩，又如要检查面是否光滑，则在“光顺性”前打钩，也可以全部勾选。
3.选好后点击““检查几何体”进行检查，有问题部分会出现红线。如果要详细一点可以点击“信息”图标，即可出现信息列表，列表会将问题详细列出。
设计好公差之后,用检测干涉的方法来检测是否有问题！！！！关键是你提前就有这方面的准备！！！！绘图之后在检测只是看一下你以前的方案是否正确！！！！
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估计，开价3000或者6000，浮动比较大。因为这个手机号码：说好不是很好，说差捏，又对不起那三个888；比较纠结。
摘要五行数理说明：号码 13823771584 (广东省深圳市 广东移动全球通卡) 的数理为：64 ，骨肉分离，孤儿悲愁，鸿运已逝之家运不幸数 (大凶) ，其暗示的信息： 见异思迁，十九不成，徒劳无功，回头是岸
诗云：黄鹤如风难复来，浮沉破病难平安，非业困苦叹悲愁，远离颠倒寿更长。
幸运星：★☆☆☆☆☆☆
号码价值评估：￥26.30
(凶)
号码 13823771584 个性系数为 4 ，主人性格类型：高度戒备难交心 型 ，具体表现： 经常处于戒备状态，对任何事都没法放松处理，孤僻性情难以交朋结友。对于爱情，就更加会慎重处理。任何人必须经过你长期观察及通过连番考验，方会减除戒备与你交往。
咨询记录 · 回答于2021-04-07
13823771584这个电话号码怎样
五行数理说明：号码 13823771584 (广东省深圳市 广东移动全球通卡) 的数理为：64 ，骨肉分离，孤儿悲愁，鸿运已逝之家运不幸数 (大凶) ，其暗示的信息： 见异思迁，十九不成，徒劳无功，回头是岸诗云：黄鹤如风难复来，浮沉破病难平安，非业困苦叹悲愁，远离颠倒寿更长。幸运星：★☆☆☆☆☆☆号码价值评估：￥26.30(凶)号码 13823771584 个性系数为 4 ，主人性格类型：高度戒备难交心 型 ，具体表现： 经常处于戒备状态，对任何事都没法放松处理，孤僻性情难以交朋结友。对于爱情，就更加会慎重处理。任何人必须经过你长期观察及通过连番考验，方会减除戒备与你交往。
不推荐这个号码
13823762482这个呢
怎么样
帮回复，谢谢
五行数理说明：号码 13823762482 (广东省深圳市 广东移动全球通卡) 的数理为：2 ，混饨未定，进退失据之分离落败数 (凶) ，其暗示的信息： 动摇不安，根基不固，摇摇欲坠，一荣一枯，一盛一衰，劳而无功诗云：混吨未定如萍动，乱离不安亦波浪，独立无力多遇困，无欲无求寿可延。幸运星：★★☆☆☆☆☆与人合伙比之独营好得多，若自己独营商则中途易受挫折。号码价值评估：￥17.00(凶)号码 13823762482 个性系数为 1 ，主人性格类型：要面包不要爱情 型 ，具体表现： 责任心重，尤其对工作充满热诚，是个彻头彻尾工作狂。但往往因为过分专注职务，而忽略身边的家人及朋友，是个宁要面包不需要爱情的理性主义者。
13823756408这个呢
你还有几个一起发来吧
帮我看看这个怎么样，谢谢
五行数理说明：号码 13823756408 (广东省深圳市 广东移动全球通卡) 的数理为：8 ，意志刚健之勤勉发展数 (中吉) ，其暗示的信息： 努力发达，贯彻意愿，不忘进退，可期成功诗云：意志坚刚善恶明，富进取心求和平，忍耐克己如心意，前难后成可安然。幸运星：★★★★★☆☆很勤勉求上进，又很有耐力，在技术界或艺能界，是最可能成功之数也。但此数因少得人和，而略感孤独些。号码价值评估：￥284.50(吉)号码 13823756408 个性系数为 2 ，主人性格类型：不善表达/疑心大 型 ，具体表现： 在乎身边各人对自己的评价及观感，不善表达个人情感，是个先考虑别人感受，再作出相应配合的内敛一族。对于爱侣，经常存有怀疑之心。
你所有的追问已经超出你支付的金额了
13823784915
五行数理说明：号码 13823784915 (广东省深圳市 广东移动全球通卡) 的数理为：35 ，温和平静之优雅发展数 (中吉) ，其暗示的信息： 处事严谨，进退保守，学智兼备，生意安稳，成就非凡诗云：温和平安艺才高，努力前途福运来，文笔奇绝仁德高，务实稳健掌门人。幸运星：★★★★★☆☆号码价值评估：￥319.50(吉)号码 13823784915 个性系数为 6 ，主人性格类型：做事喜好凭直觉 型 ，具体表现： 有特强的第六灵感，性格率直无机心，深得朋辈爱戴。感情路上多采多姿。做事喜好凭个人直觉及预感做决定。
评论收起
这个号码没看出来哪里好，就是说单从我这个外人来看的话，号码非常非常普通，就是普通的那种号码，也不算是靓号，也没有哪里哪一段比较好记，总之，普通。当然，要是对你有特殊意义那就不得了了
联通的5连号，价值在15000元左右，七分茶最近刚好接触一些贩电话号的中介，给出的是大至估价。
你好，根据你是提供的号码查询此号码为黑龙江省鸡西市的中国移动手机号码，根据五行数理分析此号码详情如下。
五行数理说明：号码 15146138707 (黑龙江省鸡西市 黑龙江移动全球通卡) 的数理为：67 ，财路亨通，志气坚强之万商云集数 (大吉) ，其暗示的信息：
时来运转，事事如意，功成名就，富贵自来
诗云：利路享通万事成，和畅逍达四海明，家运隆盛招富贵，万商云集得繁荣。
幸运星：★★★★★★☆
号码价值评估：￥406.20
仅供娱乐参考！
这个电话号码如果要卖钱的话，市场价也就在两千块钱左右。如果是abb的形式，可能就会翻一倍。
电话号码值多少钱商家说值多少就是值多少，商家是跟据人们的心理特点和个人喜好来定价。例于138*****444，在广州是不值钱的，可在香港它就非常值钱，和尾数888的号码同等价值。
有的朋友可能会对靓号为啥能卖那么贵感到好奇，毕竟有的普通的号码不仅不要钱，还送话费。都说六六大顺，手机号码15666666666（9个6），这个据说是全中国最顺利的号码，很有可能会成为史上最贵的一个靓号。让我们这些围观群众吃惊的是：这个号码的起拍价就要一千三百六十六万元，每次加价更是不能低于五万元。这个靓号的最终成交额还是未知的，因此题主想要知道的可能是，这个靓号的起拍价是怎么评估的，以及为啥靓号能卖这么贵。下面我们结合资料以及我对靓号的一些理解，一起来分析原因吧！
先说重点，为啥这个含9个六的号码能卖那么贵，它的起拍价是怎么评估的。
主要有以下几个原因：前两点原因主要将它为啥能卖这么贵，第三点原因主要讲它的拍卖底价是以什么为参考的。
一、物以稀为贵，号码很“六”，寓意好；
手机号码是根据运营商(号码前3位),地区号段(中间4位),与常规编号(后四组）组成的。一般的靓号，比如说豹子号或者顺子号的数量也不多，而像这样“6”的号码更是少见。这样的号码出现的概率，比现在网上热议的游戏“羊了个羊”的通关率（0.1%）要低多了。
“6”谐音是“溜”，顺溜或者顺利的意思。含有“6”的号码，寓意都不错，对各行各业的人都有很强的吸引力，谁不想日子和事业都顺顺利利呢？像这样含“6”量如此高的稀有号码，价格肯定会很高。像有好几个“8”或者“6”这样号寓意的靓号价格都不低，而且一个电话号码所含的“6”或“8”越多，就越稀有，越值钱。
二、靓号是身份地位的象征，通常情况下，号主非富即贵
前面说过靓号寓意好，数量少，因此价值高。它价值高的原因还和号主的消费能力有关。像我们这些普通人，也许不会考虑靓号，或者就买个小靓号，根本不会去买大靓号。倒不是因为不想买，而是因为想要的人很多，号很少，自然就只能价高者得了。
对于非富即贵的人来说，几千万也许真的不算很多。而有的人买靓号并不是为了炫富，而是为了彰显自己的实力，有时候买靓号真的能带来一些好事。当然有的有钱人买靓号就是为了开心，没有想那么多。靓号的竞拍者都是这些富人，他们的经济能力允许他们为靓号买单。
三、同类靓号的价格不低，超级“六”的靓号的价格，会只高不低
在我去阿里拍买去围观15666666666这个靓号拍卖时，顺带截了一张图。旁边两个手机号也是靓号，属于有特殊寓意型的（象征爱情），价格也不低，都是一千万。
这个靓号之所以起拍价就这么高，很有可能是参考了同类靓号的价格。举个例子，我们一起来看一下以下三个靓号的成交价格：15077777777手机号391万、15066666666手机号294.96万、18901088888手机号225万。
有的朋友会说，虽然很贵，但是它们最终的成交额也没这个九个“6”的号码的零头大。如果我们仔细看，就会发现前两个号码比这个靓号少了一位同样的数字。因此以在8个同样数字的号码成交价为参考，在9个“6”拍卖底价后面加个零，也不是很过分。寓意好，还可以加价。第三个号码只有七个“8”，最终成交价格和前两个相比，毫不逊色。
在现实中，九个数字完全相同的靓号，比八个数字一样的靓号更加稀少。物以稀为贵，有钱人也消费得起，因此它的拍卖底价就能达到这么的高。
个人感受：
尽管这样捋一遍下来，我们能大致明白为啥有的靓号能这么贵，但还是会被超级靓号的价格震惊到。靓号对有的人来说，不仅仅是一个打电话用的号码，更是身份地位的象征，或者有着某种特殊的意义。大多数的靓号由阿拉伯数字组成的连续相同的号码及比较顺口的顺子号，或含特殊意义的吉祥号码（比如说你的生日）。一般市面上流通的靓号有以下几种：
-
豹子号（AAAB）比如说130-XXXX-1115
-
对子号（AABCC）比如说186-XXX-33800
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顺子号（ABC）（ABCD）（ABCDE）倒过来（DCBA）这些手机号的某一部分递增或者递减的号码。举两个例子：132-XXXX-6543、131-XXX-12345
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特殊意义号520或者1314，个人生日、结婚纪念日等。
有的公司不仅会根据你的生日，向你推荐靓号，而且只要你对靓号的要求不是很苛刻，甚至可以为你定制靓号。不过用不用靓号，都是个人自由。虽然这九个“6”的靓号是真的靓，但是我们大多数人都是来看个热闹的。到了十月十号的时候，围观拍卖的人会更多，真的会有人不想见证史上最顺利的号码的成交（网络）现场吗？
这个号码价钱估计在300左右吧！
-
这个号码对于有的来说可能价值比较昂贵，他愿意花比较大的价钱来买，他认为这个号码可能对于他有着特殊的含义，但是如果对于其他有些人来讲的话，这个号码就可能是正常的号码，号码不值一分钱，也没有必要花钱去买这样一个电话号码。其他的电话号码也可以使用！
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测细胞因子含量常用的 elisa 方法为 ♂
测细胞因子含量常用的 elisa 方法为
- 测细胞因子含量常用的 elisa 方法为
- ELISA操作真的很简单吗
- 如何检测组织中炎症细胞因子
- 如何正确进行ELISA操作
- 金色葡萄球菌感染小鼠后，血液中的炎症因子有哪些
有一个朋友来找我咨询用流式检测细胞因子的问题，他之前用ELISA 检测细胞因子的话，发现样本量需求很多，然而有些样本量又比较少怎么办呢，那么接下来我来对比几种检测细胞因子的优缺点，供各位大大们阅读参考啦~
细胞因子（cytokine，CK）：是由免疫细胞（如单核、巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等）和某些非免疫细胞（内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等）经刺激而合成（一般是免疫细胞）、分泌的一类生物活性物质分泌的蛋白质，在体内广泛参与免疫调节及炎症反应、组织修复、刺激造血系统、刺激细胞的增殖与凋亡等重要生理活动，在抵抗外来病原及维持机体内环境平衡中均起重要作用。
细胞因子的作用方式：自分泌作用、旁分泌作用、内分泌作用。
细胞因子的作用特点：多效性、重叠性、协同性、拮抗性和双重性。
根据产生细胞因子的细胞种类不同分类：白细胞介素（interleukin, IL)、干扰素（interferon, IFN)、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF)、转化生长因子-β家族（transforming growth factor-β family, TGF-β family)、集落刺激因子（colony stimulating factor, CSF)、趋化因子（chemokinefamily)、生长因子（growth factor,GF）等。
细胞因子的检测方法一般分为生物学、分子生物学测定法及免疫学（重点介绍）
1、生物学测定法 其原理是根据细胞因子对特定的依赖性细胞株(即靶细胞)的促增殖作用,以增殖细胞中的DNA的合成或酶活性为指标,间接推算出细胞因子的活性单位,如对IL-1、IL-2等细胞因子活性的检测。亦可根据某些细胞因子对特定靶细胞的杀伤效应或对病毒的抑制作用进行测定,如对肿瘤坏死因子及干扰素的生物活性测定。
2、分子生物学测定法 目前采用的技术有各种印迹法、斑点杂交、原位杂交和PCR等。通过检测细胞内细胞因子的基因组成或mRNA量,推算出细胞因子的合成量。
3、免疫学检测法 其基本原理是将细胞因子作为抗原进行定量检测。如免疫斑点法、ELISA法、免疫印迹法和流式细胞仪等均已用于细胞因子的检测。
细胞因子的检测方法对比
1、酶联免疫吸附实验（ELISA）
原理：使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。由于酶的催化频率很高，故可放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
优点：避免特异性抗体直接标记，便宜。
缺点：所需样本量多、每次仅能测定一项细胞因子、操作步骤和测定时间过长、酶联反应所致的人工假象
2、流式细胞仪（CBA）
原理：利用微小、分散的颗粒捕获液体待测物，并利用流式细胞仪检测类似“三明治”的颗粒——待测物复合体所散发的荧光，从而测定待测物的数量。
优点：所需样本量少、快速（实验6-8h可以完成）操作简便、灵敏度高、重复性好、高效（同一个样品可以同时检测多个因子）、安全、接近生物体的分析条件（全血检测保留细胞及生化微环境更准确反应了体内状况）。
酶联免疫吸附试验(enayme liked immunosorbent assay，ELISA)是20世纪70年代发展起来的一种检测技术，因其具有敏感性高、特异性强、操作简单等优点，被广泛应用于各种抗原和抗体的测定，为辅助临床诊断与生物科研起到了积极的推动作用。但ELISA测定中影响因素较多，操作过程中每个环节都会对试验结果产生影响，出现错误的结果。现笔者对影响实验结果的常见因素及相应的控制方法分析探讨如下：
1试剂的因素
1.1试剂的选择
试剂的选择是保证血液检测质量的关键要素。虽然国家采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，但不同厂家的试剂在使用效果上仍存在在差异。要选购知名度相对高、具有“三证”的试剂，不要用无批号的试剂，最好选用与仪器配套的试剂。更不要使用过期的试剂和混用不同批号的试剂。
1.2试剂的准备
在临床实验室，对试剂的准备一般不太注意，通常的做法是在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此，在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。
2样本的因素
2.1内源性干扰因素
包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等。
2.1.1类风湿因子在类风湿患者及正常人血清中，常含有较高或不同浓度的类风湿因子(RF)，其一般为IgM型，亦有IgG和IgA型，具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因为在ELISA测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。避免其发生的方法有：①用F(ab)2替代完整的IgG。②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理。③检测抗原时，可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
2.1.2补体在固相酶免疫测定中，来自哺乳动物的固相抗体和酶标二抗均有激活人补体系统的功能。一方面，固相抗体和酶标二抗可因其吸附及结合过程中抗体分子发生变构，使Fc段的补体C1q结合点暴露出来，使C1q成为一个中介物将二者交联起来出现假阳性结果。另一方面，固相抗体也会因为活化补体的结合，封闭抗体和抗原的表位结合能力而引起假阴性。解决的办法是：①用EDTA稀释标本。②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活。
2.2外源性干扰因素
包括标本溶血、标本被细菌污染、标本保存时间过长和标本凝固不全等。
2.2.1标本的溶血血红蛋白中含铁血红素有类过氧化物酶的活性，因此，在以辣根过氧化物酶(HRP)为标志的ELISA测定中，如血清样本中血红蛋白浓度较高，则很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。所以在采血时应注意手法，采集的血液勿用力振荡，严防标本溶血。
2.2.2标本的污染菌体可能含有内源性辣根过氧化物酶，可使实验出现非特异性显色。因此，ELISA检测宜采集新鲜标本，如不能当时测定，5 d之内应4℃保存，1周后检测应低温冻存；同时，收集标本采用无菌试管，可防止标本的污染。
2.2.3标本的保存标本在冰箱中保存过久，血清中IgG可聚合成多聚体，AFP可形成二聚体，在用间接法测定中会导致本底过深，甚至造成假阳性。 冰冻保存的标本反复冻融产生机械剪切力对标本中的蛋白等分子有破坏作用，可引起假阴性结果。因此，ELISA检测尽量采用新鲜标本，长时冻存的样本避免反复融冻。
2.2.4标本凝固不全凝固不全的血清中含有部分纤维蛋白原，可使结果呈假阳性。解决的方法有：①于采血管中加入适当的抗凝剂；②将采集后的血液放在架子上再放入37℃水浴中1 h，待充分凝固后再离心分离血清。
3操作中的因素
3.1加样 ?孵育前加样时间过长，酶试剂加出孔外，使用滴瓶滴加试剂时，滴加的角度不同和挤压的力度不同，致使滴加的试剂量不准，都可导致试验结果不准确。控制方法：①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
3.2温育 ?温育是ELISA测定最为关键、最容易出现问题的步骤。最为常见的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2-8℃。目前国内售ELISA试剂盒温育时间为37℃，30 min-1 h，进口ELISA试剂盒则通常为37℃，1-2 h能有较完全的结合。
3.2.1温育时间、温度的选择一般根据试剂盒的说明书选择温育的时间、温度。加完样本和（或）试剂后将微孔板从室温放入水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃需要一定时间，如果是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就容易造成实际测定中温育时间不够，易致弱阳性标本测不出来。控制方法：①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察。
3.2.2 “边缘效应”的排除“边缘效应”是在使用96孔板的ELISA测定中，外周孔显色较中心孔深的现象。产生的原因可能是为96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度造成的，因此在温育时尽量采用水浴。
3.3洗板 ELISA测定的洗板一般有两种方式，即手工和洗板机洗板。采用手工洗板，孔与孔之间液体易交叉，采用半自动洗板机时，洗液量不足导致洗板不彻底，洗板针堵塞导致抽吸不完全，洗板不畅导致清洗效果差。控制方法：①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数，有资料报道洗板7次能达到理想的洗涤效果。
3.4显色 市售ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
3.5结果判定
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
综上所述，尽管ELISA法操作简单，但可能影响测定结果的因素也较多。故在实际操作的过程中，要加强质量管理，认真避免或减少影响因素，力求结果准确，为疾病的诊断和科研提供可靠的依据。
检测细胞因子的方法主要有生物学检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法。
1、生物学检测法
2、免疫学检测法
3、分子生物学方法
临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。现分述如下。 一.临床标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响，只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面： （1）要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。 （2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 （3）血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。 （4）冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。 （5）标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。 二、试剂准备 在临床实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是，在实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外，当试剂盒以OPD为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。 三、加血清样本及反应试剂 在现在的ELISA商品试剂盒中，血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象，这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附，从而引起非特异显色。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。 四、温育 温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。 温育这一步是临床ELISA测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点： （1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。 （2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床ELISA测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。 （3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。 总而言之，在临床ELISA测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。 五、洗板 固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术，需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来，以保证ELISA测定的特异性。因此，洗板对于ELISA测定来说，也是极其关键的一步。以HRP作为标记酶的ELISA试剂盒中使用的洗板液一般为含0.05%Tween20的中性PBS，Tween20为一种非离子去垢剂，既含亲水基团，也含疏水基团，其在洗涤中的作用机理是，借助其疏水基团与经疏水性相互作用被动吸附于聚苯乙烯固相上蛋白的疏水基团形成疏水键，从而削弱蛋白与固相的吸附，同时在其亲水基团与液相中水分子的结合作用下，促使蛋白质脱离固相而进入液相，这样就可达到去掉非特异吸附物的目的，但由于抗体或抗原的包被通常也是通过在碱性条件下与固相的疏水性相互作用而被动吸附于固相，因此要注意非离子去垢剂的使用浓度，洗板液中Tween20浓度高于0.2%，可使包被于固相上的抗原或抗体解吸附而影响试验的测定下限。 在临床实验室中，ELISA测定的洗板一般有两种方式，即手工和洗板机洗板。手工洗板即是在每次反应温育后，将反应液吸出或甩干，然后在板孔中加满洗液，放置2～3分钟后，将洗液吸出或甩干，再在吸水纸上拍干。重复上述洗涤步骤3～4次，最后在吸水纸上拍干，即可进行下一步测定操作。洗板机洗板则是将上述手工操作改由洗板机进行，使用洗板机洗板的一个特点是，每次洗板后不能拍干，故有较多的液体残留，液体残留量小的洗板机洗板至彻底所需的次数要少于残留量大的洗板机。在特定临床实验室所使用的洗板机，到底洗中国次能达到要求，可进行下面这个简单的实验：选择4×8 HBsAgELISA包被板条，每2×8孔分别加入相同一份弱阳性和一份阴性样本，按试剂盒说明加入酶结合物并完成温育后，洗板孔时按第一排4孔洗1次、第二批4孔洗2次、第3排4孔洗3次——直至第8排4孔洗8次，加底物显色测定，如洗3次后，显色不再改变，即洗3次的板孔比色测定与4次、5次洗板的板孔的吸光度等相同，阳性/阴性值保持最大不变，则可以认定该实验室所用洗板机3次洗板即可达到要求。 六、显色 在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中，如以TMB为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以OPD为底物，则试剂盒提供OPD片剂或粉剂，临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15～30分钟。从理论上说，37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全，尽管在最初的10分钟内，绝大部份催化反应即可完成。因此，为使弱阳性样本孔能有充分的显色，建议在37℃下反应25～30分钟后，终止反应比色测定。 此外，在加入底物开始显色反应前，最好是先检查一下底物溶液的有效性，即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中，观察是否有显色出现，如有，则说明底物已变质。以OPD为底物，配好后应为无色，否则就不能使用。以TMB为底物，整个显色反应过程无需避光，而以OPD为底物，则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后，加入酸终止反应，振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。 七、比色 ELISA的比色测定由酶标仪进行，有的同行可能会认为，既然由酶标仪进行，那么此时便可以万事大吉了，其实不然，因为当代较为先进的酶标仪器仪表，均有较多的功能，使用不当，会得到令人难以理解的结果。如使用酶标仪比色测定后，有许多阴性测定孔的吸光度值为负数或测定假阳性率大大增加等等。这主要是没有正确地理解和使用酶标仪所致。至于如何正确理解和使用酶标仪详见后面有关章节。此处，只是强调下面两点： （1）比色测定时，一定要注意酶标仪的波长是否已调至合适或所用滤光片是否正确。由于有的临床实验室在进行ELISA测定时，以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用，而前者比色波长为450nm，后者为492nm，滤光片需根据要求随时更换。因此，容易出现滤光片错用的问题。 （2）单波长或双波长比色选择的问题。中档以上的酶标仪基本上都同时具有单波长和双波长比色功能。所谓的单波长比色即是通常的以对显色具有最大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定；而双波长双色则酶标仪在敏感波长如450nm和非敏感波长如630nm下各测定一次，敏感波上下的吸光度测定值为样本测定酶反应特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、灰尘等脏物所致的吸光度之和；非敏感波长下测定即改变波长至一定值，使得样本测定酶反应特异显色的吸光度值为零，此时测得的吸光度即为脏物的吸光度值。最后酶标仪给出的数值为敏感波长下的吸光度值与非常感波长下的吸光度值的差。因此，双波长比色测定具有能排除由微滴板本身、板孔内标本的非特异吸收、指纹、刮痕、灰尘等对特异显色测定吸光度的影响的优点，一般不必设空白孔。如在使用双波长比色时，仍设空白孔，就可能会造成前面提到的测定孔吸光度为负数的现象。由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性，也就是说每次测定或同次测定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度测定值，故而在ELISA测定比色时，最好是使用双波长比色。 八、结果判定 临床ELISA测定按其表示测定结果的方式分为定性和定量测定两大类。定性测定只是对标本中是否含有待测抗原或抗体作出“有”或“无”的结论，分别用“阳性”和“阴性”来表示。可见定性测定通常是用于传染性病原体的抗原或抗体的测定，以判断特定病原体感染的存在与否。而定量测定则是对标本中待测抗原的中国进行量值测定，以具体数值表示。定量测定基本上是用于非病原体抗原物质的测定，如激素、细胞因子、肿瘤标志物、小分子药物等。目前国内在临床上应用的ELISA试剂盒绝大部份是用于传染性病原体的抗原或抗体的定性测定，也有少部份用于αFP、hCG、细胞因子等的定量测定。ELISA定性测定的“阳性”和“阳性”的判定依据是试剂盒所确定的阳性判定值（Cut-off）。定量测定的“量值”依据是试剂盒中所带标准品同时测定得出的剂量反应曲线（又称标准曲线）。有关ELISA定性和定量测定结果的数据处理后面将有专门章节讨论。本处只想强调的一点是，ELISA定性测定的“阴性”和“阳性”结果的判定依据只能是试剂盒本身所确定的Cut-off值，而不能以卫生部临床检验中心供应弱阳性定值质控血清。为什么要强调这一点呢？主要是因为以前有很多基层实验室均使用部中心供应的弱阳性定值质控血清（以前也称“临界值”血清）的测定吸光度来判定结果，高于其判为阳性，反之为阴性，而不管试剂盒Cut-off值为何。到目前为止，仍有一些实验室在坚持这种错误的做法。试剂盒的Cut-off值的设立是建立在一系列科学试验及统计学研究的基础上的（详见后述），而部中心供应的弱阳性定值质控血清主要是供临床实验室进行室内质控时使用。 下面再解释一下在ELISA定性测定结果判定中常用的一些缩写。 （1）S/CO：其中S为Sample(样本)或Specimen(标本)的简写，表示的是标本测定的吸光度值，CO为Cut-off值的简写。除竞争抑制法外，其它ELISA定性测定模式中，当S/CO值大于或等于1时，标本的测定为阳性，小于1时为阴性。 （2）S/N或P/N：其中S同（1），N为Negative(阴性对照)的简写，P为Patient（患者）的简写。较早的试剂盒很多都使用S/N或P/N≥2.1为阳性判定标准，现仍有一些试剂盒使用这种方式。这种方式与S/CO方式无根本性区别，只不过是前者将阴性对照（N）的2.1倍视为Cut-off值而已。 九、结果报告及解释 临床ELISA测定结果的报告较为简单。定性测定报阴性或阳性即可；定量测定则报出具体的数值。结果解释比较起来要复杂的多，它要求实验室技术人员对所测定的项目有较为全面的知识基础。例如，对乙肝“两对半”结果的解释，不但要求检验者要知道不同的结果模式的临床意义，而且必须对乙肝病毒的分子生物学、分子的变异及其对表型的影响有更深层次的了解。现在，检验不再是单纯的实验室测定，而已成为一门临床医学学科，即检验医学，这就要求从事医学检验工作的检验医师，对所做的测定项目除了知其然，还要知其所以然，否则就难免为时代所淘汰。 综上所述，尽管ELISA测定的操作步骤非常简单，但有可能会影响测定结果的因素却较多，分布在测定操作的各步之中，尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因，特对常见问题及原因归纳总结于下表。 临床ELISA测定中可能会出现的问题及可能的原因 问 题 可能的原因（非试剂盒本身的原因） 1．弱阳性质控样本检测不出 温育的时间或温度不够；显色反应时间太短；所用配制缓冲液的蒸馏水有问题 2．测定的重复性差 （相同样本两次测定结果不一致） 这是典型的由测定操作引起的问题，包括 （1）加样本及试剂量不准；孔间不一致； （2）加样过快，孔间发生污染； （3）加错样本； （4）加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区； （5）不同批号试剂盒中组分混用； （6）温育时间、洗板、显色时间不一致； （7）孔内污染杂物； （8）酶标仪滤光片不正确； （9）血清标本未完全凝固即加入，反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞，易出现假阳性反应等。 3．白板 （阳性对照不显色） （1）漏加酶结合物； （2）洗板液配制中出现问题，如量筒不干净，含酶抑制物（如叠氮钠）等。 （3）漏加显色剂A或B； （4）终止剂当显色剂使用。 4．全部板孔均有显色 （1）洗板不干净； （2）显色液变质； （3）加底物的吸光受酶污染； （4）洗板液受酶等污染
方法:C57BL/6小鼠分别通过静脉或腹腔注射金黄色葡萄球菌标准菌株以诱导血流感染;观察各组小鼠生存率、体重变化及脓毒症评分(MSS);进行血样本及组织匀浆培养以确定细菌负荷;ELISA法检测血清或组织匀浆中的CRP、PCT及细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)水平;同时观察各组小鼠肝、肺、肾脏的病理改变及病理炎症评分。结果:4.5×10~8CFU/ml金黄色葡萄球菌血流感染小鼠的生存率约为70%。感染后24
h,小鼠体重明显减轻,MSS明显升高,且静脉组高于腹腔组。WBC于感染后3
h显著升高;感染后48
h血清CRP、PCT水平达到峰值,分别为静脉组:60.80±5.63、6.796±1.16,腹腔组:40.58±7.54、2.740±0.36;血清及组织匀浆(肝、肺、肾)中IL-1β、IL-6和TNF-α水平均有不同程度的升高,且静脉组高于腹腔组。感染12h后开始出现肝、肺、肾组织不同程度的病理炎症改变,且病理炎症评分随之显著升高。
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