elisa试剂盒内都有什么产品
- elisa试剂盒内都有什么产品
- elisa试剂盒的组成结构
- 试剂盒有多少种ELISA试剂盒是哪种
- 什么是elisa试剂盒
- 一般常见的ELISA试剂盒有哪些种类
- 试剂盒的组成
- elisa试剂盒的主要设备
- 常见的ELISA试剂盒都有哪些
- elisa试剂盒的基本组成和研制程序是怎样的求解!
- 酶联免疫试剂盒(Elisa试剂盒)具体有哪些
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:13.5U/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 20倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 30ml×1瓶 2-8℃保存
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测 试剂盒成分 1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T 2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1 3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1 5 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1 6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1 7 终止液: 1N硫酸 12mL x 1 8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
1、细胞因子检测试剂盒:如白介素、选择素、集落刺激因子,肿瘤坏死因子,干扰素,转化生长因子,趋化因子,细胞因子受体,粘附分子,生长因子,凋亡因子等等 2、心肌梗塞检测试剂盒:如肌钙蛋白,肌红蛋白,C-反应蛋白等等 3、内分泌检测试剂盒:如甲状腺,胰腺,性激素,孕酮,睾酮,生长激素,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,促肾上腺皮质激素,促卵泡素,雌二醇,雌三醇等等 4、肝纤维化检测试剂盒:如纤维连接蛋白,透明质酸,胶原,基质金属蛋白酶抑制因子,基质金属蛋白酶,层粘蛋白等等 5、自身免疫检测试剂盒:如甲状腺,抗核抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体等等 6、肿瘤标志物检测试剂盒:如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子等等 7、优生优育检测试剂盒: 8、传染病检测试剂盒如百日咳,EB病毒,A族链球菌等等 9、特种蛋白检测试剂盒如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等
通过酶联免疫吸附反应进行实验
来检测特定物质的试剂盒
试剂盒中会有不同浓度的标准样品
在酶标条中
通过固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物反应
可形成标准曲线
从而进行试验样品的测定
检测不同的物质有对应不同的试剂盒
1、细胞因子检测试剂盒:
如白介素、选择素、集落刺激因子,肿瘤坏死因子,干扰素,转化生长因子,趋化因子,细胞因子受体,粘附分子,生长因子,凋亡因子等等
2、心肌梗塞检测试剂盒:
如肌钙蛋白,肌红蛋白,C-反应蛋白等等
3、内分泌检测试剂盒:
如甲状腺,胰腺,性激素,孕酮,睾酮,生长激素,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,促肾上腺皮质激素,促卵泡素,雌二醇,雌三醇等等
4、肝纤维化检测试剂盒:
如纤维连接蛋白,透明质酸,胶原,基质金属蛋白酶抑制因子,基质金属蛋白酶,层粘蛋白等等
5、自身免疫检测试剂盒:
如甲状腺,抗核抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体等等
6、肿瘤标志物检测试剂盒:
如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子等等
7、优生优育检测试剂盒:
8、传染病检测试剂盒
如百日咳,EB病毒,A族链球菌等等
9、特种蛋白检测试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的最终体积而异,在板式ELISA中一般采用3mol/L。
试剂
(1) 包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):
Na2CO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至1000ml
(2) 洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸馏水至1000ml
(3) 稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
(4) 终止液(3M H2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):
0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml
0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
(6) TMB(四甲基联苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml
底物缓冲液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物缓冲液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
(8) 抗原、抗体和酶标记抗体。
(9) 正常人血清和阳性对照血清。
器材
(1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。
(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
试验原理
试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
4. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
5. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
9. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
10. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
11. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
12. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
一、食品安全检验ELISA试剂盒
是指食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒,以及微生物、维生素等的检测产品。
包括植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒,以及动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒。
二、生物原装ELISA试剂盒以及各类国产ELISA试剂盒
1、细胞因子检测试剂盒:
如白介素、选择素、集落刺激因子,肿瘤坏死因子,干扰素,转化生长因子,趋化因子,细胞因子受体,粘附分子,生长因子,凋亡因子等等
2、心肌梗塞检测ELISA试剂盒
如肌钙蛋白,肌红蛋白,C-反应蛋白等等
3、内分泌检测ELISA试剂盒
如甲状腺,胰腺,性激素,孕酮,睾酮,生长激素,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,促肾上腺皮质激素,促卵泡素,雌二醇,雌三醇,5-羟色胺,17-羟孕酮等等
4、肝纤维化检测ELISA试剂盒
如纤维连接蛋白,透明质酸,胶原,基质金属蛋白酶抑制因子,基质金属蛋白酶,层粘蛋白等等
5、自身免疫检测ELISA试剂盒
如甲状腺,盐水可提取核抗原抗体(ENA),抗核抗体,DNA,抗心磷脂抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体,胰蛋白酶原,Sm,大疱性类疱疮,蛋白酶,短膜虫法,肝-肾,肝-肾-胃,肌内膜抗体,角蛋白抗体,抗核抗体,抗核糖体蛋白抗体,抗聚角蛋白微丝蛋白抗体,抗链O,抗卵巢抗体,抗平滑肌抗体,抗线粒体抗体,等等
7、优生优育检测ELISA试剂盒
如早早孕,新生儿TSH,胎膜早破检测,抗子宫内膜抗体,抗心磷脂抗体,抗透明带抗体,抗卵细胞透明带抗体,抗卵巢抗体,抗精子抗体,巨细胞病毒,弓形体,风疹病毒,分娩预测,单核白细胞增多症,单纯疱疹病毒,促卵泡素,促黄体生成素,便隐血试纸,HCG等等
8、传染病检测ELISA试剂盒
如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB 病毒,A族链球菌等等
9、特种蛋白检测ELISA试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
10、肿瘤标志物检测ELISA试剂盒
如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子,胰腺癌,直肠癌,细胞角蛋白片段,胃肠癌,铁蛋白,糖链抗原,神经特异性稀醇化酶,上皮膜抗原,乳腺癌,人抗小鼠抗体,前列腺,甲胎蛋白,肝癌,大肠癌,肺癌,大小便隐血检测,癌胚抗原,β-2微球蛋白等等
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。
楼主你说的研制程序是指什么?楼主,我建议你去注册生物秀论坛,那上面关于Elisad的原理,试剂,操作步骤,注意事项,可能存在的问题都有详细说明,而且都比较专业,可信。
酶联免疫试剂盒,也就是ELISA试剂盒。其中包括:
组蛋白脱乙酰基酶ELISA试剂盒、组织蛋白酶ELISA试剂盒、蛋白酶抑制因子ELISA试剂盒、转化生长因子β结合蛋白ELISA试剂盒、纤溶酶原激活因子ELISA试剂盒、组织因子通道抑制因子ELISA试剂盒等。
参考资料:百度一下“武汉福来生物工程”
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